Obtención de un antiveneno faboterápico para la especie Bothrops SP.

Las mordeduras de serpientes venenosas son emergencias médicas frecuentes en ciertas regiones del mundo, entre ellas Colombia, causando un elevado número de muertes y discapacidades físicas permanentes cada año (Theakston y col., 2003). Sin embargo, aun cuando son considerados eventos comunes, el tratamiento específico de estos accidentes se dificulta cada vez más debido a la baja disponibilidad y al costo de producción de los llamados ¿Antivenenos¿, los cuales son preparaciones de inmunoglobulinas purificadas a partir del plasma de animales inmunizados (WHO, 1981; Theakston y col., 2003). Recientemente, debido a presiones comerciales algunos laboratorios productores de antivenenos cesaron o redujeron drásticamente la producción, llevando a la persistencia de la escasez ya existente y por lo tanto, a la falta de disponibilidad del tratamiento para humanos en varias partes del mundo (Theakston y col., 2003; Chippaux y col., 2005; Stock y col., 2007). El precio de estos productos es alto, entre otras razones, debido a que el plasma hiperinmune debe ser sometido a un proceso de purificación de las fracciones de inmunoglobulinas (Cardoso y col., 1993). En los comienzos de la seroterapia, los tratamientos para mordeduras de serpientes o infecciones como difteria o tétanos consistían en la inyección de suero hiperinmune completo de equino (von Behring y Kitasato, 1890; Physalix y Bertrand, 1894; Calmette, 1984). Luego de éste período inicial, la presentación farmacéutica de los llamados antivenenos y antitoxinas se fue modificando para disminuir el alto número de reacciones adversas producidas por el suero completo. Estas modificaciones consistieron en la eliminación de la albúmina y las globulinas no inmunes, además de otras proteínas no inmunes del suero. Los procesos de purificación de plasma hiperinmune o suero tienden a obtener solamente las inmunoglobulinas purificadas, químicamente modificadas o enzimáticamente tratadas a fin de bajar la ocurrencia de reacciones adversas (De Roodt y col., 2004). Las modificaciones tienen por objeto disminuir los efectos colaterales, reacciones de hipersensibilidad y anafilactoides causadas cualitativamente por la inoculación de proteínas extrañas y cuantitativamente por la gran cantidad de proteínas inoculadas en el torrente sanguíneo (Grasset y Christensen, 1947; Christensen, 1966; Morell, 1986). Las reacciones adversas ocurridas por la inyección de proteínas heterólogas como los antivenenos son frecuentes en humanos. (Sutherland y Lovering, 1979; Reid, 1980; Sullivan, 1987; Moran y col., 1998). En el caso de los antivenenos ofídicos, en casi todo el mundo son producidos en caballos (Theakston y Warrell, 1991) debido a las excelentes características de estos animales para la producción de sueros hiperinmunes (Sjostrom y col., 1994). Las globulinas hiperinmunes en el suero equino son IgG, particularmente del isotipo IgG (T) (Ek, 1974; Fernández y col., 1997), un isotipo altamente glicosilado y muy antigénico, debido a las características químicas de las glicoproteínas. Las reacciones adversas producidas por el uso de antivenenos o antitoxinas purificadas están descritas en una gran variedad de aspectos para los humanos (De Roodt y col., 1997; Leisewitz y col., 2004). Hasta el presente, el uso de fragmentos F (ab¿)2 parece ser la mejor presentación farmacéutica para uso humano debido a su baja incidencia en la producción de efectos adversos y su farmacocinética (Krif y col., 1999). Debido a que los sueros antiofídicos de cuarta generación no se encuentran disponibles a nivel nacional, nuestro propósito es desarrollar faboterápicos a partir de inmunoglobulinas IgG extraídas del plasma equino, estandarizando la técnica por la cual se producen las fracciones F (ab¿)2 y estudiando posteriormente la potencia neutralizante de los mismos (Otero y col., 2007). Para tal efecto realizaremos inmunizaciones seriadas con veneno Bothópico en equinos, hasta obtener adecuada titulación de anticuerpos, se realizará la extracción del plasma y serán procesadas las inmunoglobulinas IgG, purificadas hasta adquirir los fragmentos F (ab¿)2. Dichos fragmentos se someterán a pruebas de potencia para verificar la dosis efectiva 50 (DE50), comparándola con la potencia de las inmunoglobulinas completas IgG (WHO, 2010).