Detalles del proyecto
Descripción
Antecedentes: Nuestras recientes investigaciones en dientes con Amelogenesis imperfecta hipocalcificada (AI), un desorden hereditario, que afecta principalmente la estructura del esmalte dental, demostró que extractos de plantas nativas colombianas como la Ilex guayusa y Piper marginatum aposicionan iones de fosfato y ortofosfato sobre la estructura del esmalte dental, pero no se conoce aún si estos extractos producen efectos tóxicos sobre la pulpa dental. Objetivo: Evaluar la citotoxicidad producida por dos extractos de plantas nativas colombianas Ilex guayusa y Piper marginatum sobre células madre mesénquimales de pulpa dental humana (hDPSC) a través de espectroscopia Raman, microscopia de fluorescencia y citometría de flujo, para determinar si estos extractos son seguros para su uso en boca. Métodos: Para la técnica de espectroscopia Raman fueron sembradas las hDPSC sobre nanobiochips (dispositivos para amplificar la señal) colocados previamente en cajas de 35mm (well transfer Corning Costar). A los 8 días de cultivo, concentraciones de 10,50 y 100 ppm, de extractos de Ilex guayusa y de Piper marginatum fueron agregados en forma separada, y fueron realizadas mediciones Raman sobre las células, a las O, 12 y 24 horas de aplicados los extractos. Paralelamente fueron realizados los análisis por Microscopia de fluorescencia utilizando el microscopio OLIMPUS FV1000 y el Kit live-dead, asi como la citometría de flujo utilizando el citómetro de flujo (BD FACS Canto TM II) y analizando las muestras con el programa Flowjo. Resultados: Los resultados obtenidos con espectroscopia Raman de las hDPSC, expuestas a las diferentes concentraciones de los extractos de Ilex guayusa y de Piper marginatum, mostraron espectros correspondientes a células vivas. Estos resultados fueron contrastados con técnicas de citometría de flujo y microscopia de fluorescencia, corroborando que los extractos presentaron muy poca citotoxicidad. Conclusiones: Los extractos de las plantas Ilex Guayusa y Piper marginatum, mostraron en general poca citotoxicidad, que esta técnica es confiable en estudios toxicológicos de la cavidad oral sugiriendo que estos son seguros y que podrían utilizarse en un futuro para ser aplicados sobre esmalte y dentina con fines de remineralización. La técnica Raman utilizando nanotecnología, permitió la evaluación de la viabilidad de células hDPSC expuestas a los extractos
Estado | Activo |
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Fecha de inicio/Fecha fin | 28/11/23 → 27/06/25 |