Desarrollo de una estrategia para la producción de la enzima N-acetilgalactosamina-6-sulfato sulfatasa producida en E. coli y P. pastoris empleando glicosilaciones modificadas sintéticamente.

La terapia de remplazo enzimático (TRE) es una de las principales estrategias para el tratamiento de algunas enfermedades genéticas como los Errores Innatos del Metabolismo (EIM). En la actualidad esta representa la la principal alternativa para el tratamiento de pacientes con algunas enfermedades de depósito lisosomal, para las que ha sido aprobada la terapia y en las que se ha observadouna importante mejoría en algunos de las manifestaciones somáticas de las enfermedades. Estas enzimas son producidas de forma recombinante en células de mamífero. Durante los últimos años nuestro laboratorio ha trabajado en la producción de enzimas lisosomales en microrganismos. A pesar que se ha mostrado la posibilidad de producir enzimas activas en Escherichia coli y Pichia pastoris, aun no se ha evaluado el efecto de la ausencia de glicosilaciones en el primer caso o de glicosilaciones diferentes a las de humano en el segundo, o de estrategias para modificar/adicionar estas cadenas de azúcares, lo que podrían limitar la aplicabilidad de estas enzimas en una eventual TRE. Adicionalmente, la capacidad de estas enzimas para favorecer la disminución de los sustratos acumulados no ha sido aún demostrada. Por tanto, este proyecto busca entender el efecto de las glicosilaciones (naturales o sintéticas) sobre la enzima lisosomal N-acetilgalactosamina-6-sulfato sulfatasa (GALNS) producida de forma recombinante en E. coli y P. pastoris.