Correlación entre la expresión constitutiva la concentración de proteína y la actividad biológica de las lacasas recombinantes POXA1 B de Pleurotus ostreatus y GLlac 1 de Ganoderma lucidum en Pichia pastoris.

En muchos trabajos de investigación se mide la expresión heteróloga de los genes clonados a través técnicas como la SDS-PAGE combinada con densitometría, se reconoce la proteína y se cuantifica con anticuerpos específicos a través de técnicas como el Western-Blot o el ELISA y finalmente se determina la actividad biológica (si es una enzima) con la técnica adecuada. Lo cierto es que la síntesis de RNA mensajero específico (transcripción) en muchas ocasiones no está relacionada con la cantidad de proteína resultante de la traducción, que las modificaciones pos-traduccionales no siempre se completan o se llevan a cabo de la manera adecuada; lo que significa que toda la proteína que se produce no será necesariamente activa. Por otro lado la actividad proteolítica propia de la célula hospedero entre otras, atentan contra la concentración de proteína específica producida y contra la actividad que pueda ser detectada. Valorando lo anterior, este proyecto ¿Seguimiento de la expresión constitutiva de las lacasas recombinantes POXA1 B de Pleurotus ostreatus y GLlac 1 de Ganoderma lucidum en Pichia pastoris. Correlación RNA-Proteína-Actividad Biológica¿ de apoyo a programas de doctorados se pretende correlacionar y seguir a través del crecimiento cinético de las cepas recombinantes la producción de RNA específico, la concentración de enzima específica y la actividad biológica; lo cual será de gran valor para entender esta dinámica del modelo y para tomar decisiones relacionadas con las mejores condiciones de trabajo y el momento exacto del cultivo en que debería detenerse el proceso de producción de lacasas recombinantes.